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        核酸染料的推薦使用方法和注意指南
        發布時間:2019-05-05   點擊次數:3304次
           核酸染料的推薦使用方法和注意指南
          核酸染料的使用方法:
          注意:染料使用前應在室溫下徹底融化混勻后使用。
          核酸染料后染方法(推薦方法)
          1.制作不含染料的凝膠,按照常規方法進行電泳。
          2.用pH7.0-8.5的緩沖液(如:TAE,TBE或TE),按照10000:1的比例稀釋核酸染料濃縮液(如50ml1×TAE中加入5μl染料),混勻,制成染色溶液。
          3.將染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中,放入凝膠,用鋁箔蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10-30分鐘,染色時間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色,將配好的工作溶液輕輕地倒在膠板上,讓工作液均勻地覆蓋整個膠板,并染色30分鐘。玻璃平皿必須預先經過硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
          4.紫外燈下觀測。
          核酸染料預染方法
          1.制膠:按常規方法制備凝膠,凝膠溫度降至60℃左右時加入10000×SYBR,使染料終濃度為1×,如40ml凝膠溶液中加入4μl染料。
          2.上樣、電泳后紫外燈下觀察。
          核酸染料的使用注意事項
          1.膠厚度不宜超過0.5cm,膠太厚會影響檢測的靈敏度。
          2.加核酸染料的瓊脂糖凝膠反復融化可能會對核酸檢測的靈敏度產生一定影響,但不明顯。
          3.通過凝膠電泳回收DNA片段時,建議使用核酸染料染色,在自然光下切割DNA條帶,避免紫外線與EB對
          目的DNA產生的損傷,可明顯提高克隆、轉化、轉錄等分子生物學下游操作的效率。
          4.雖然未發現核酸染料有致癌作用,但是各種核酸染料的致癌作用學術界一直存在爭議,同時核酸染料對皮膚、眼睛會有一定的刺激,為安全起見,我們強烈建議操作時依然應該每次帶手套,不小心接觸
          皮膚后應該立刻清洗,并妥善處理廢棄物。
          以上便是今天關于核酸染料的推薦使用方法和注意指南的全部分享了,希望對大家今后使用本設備能有幫助。
         
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